電穿孔儀電轉(zhuǎn)杯主要由兩個扁平的電極,一個帶有過濾功能并且散布有直徑大約為100nm納米孔的碳酸脂膜(PC膜)以及一個用來支撐兩個電極的支撐部分組成,在使用新裝置進(jìn)行生物大分子的轉(zhuǎn)化時(shí),先將需要傳遞的試劑加到底部的鈦電極上,之后立即將帶有膜的支撐部分放置到底部電極之上,接著第二片鈦電極被放到整個裝置的頂部,給兩個電極之間施加電脈沖,使細(xì)胞膜上形成納米孔,生物大分子得以進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部。
電穿孔儀電轉(zhuǎn)杯為一次性消耗品,實(shí)際上維護(hù)得好的話可以多次重復(fù)使用為提高重復(fù)使用壽命,請大家注意:
1、電轉(zhuǎn)杯的電極為鋁合金制作,會與鹽酸劇烈反應(yīng),腐蝕電極表面。而破損的電極表面既不利于消毒,也會影響電轉(zhuǎn)效率。同樣的原因,也不允許用堿液(鋁與強(qiáng)堿反應(yīng))、次氯酸鈉溶液(強(qiáng)酸性)浸泡處理。可以在實(shí)驗(yàn)室里看到許多電極上布滿坑洞的舊電轉(zhuǎn)杯,就是酸處理的結(jié)果,請大家將這些都丟棄掉。
2、不要將電轉(zhuǎn)杯長期在水或酒精溶液中浸泡保存。鋁的性質(zhì)活躍,在水中長期浸泡會形成氫氧化鋁膠體并逐漸腐蝕,同時(shí)易滋生細(xì)菌。而浸泡于酒精溶液僅能抑菌,并不能阻止腐蝕,時(shí)間長了酒精揮發(fā)散失依然會長菌。另一個問題是酒精溶液長期浸泡會導(dǎo)致電轉(zhuǎn)杯的硬質(zhì)聚碳酸酯外殼碎裂,因而也應(yīng)避免。
3、電轉(zhuǎn)的關(guān)鍵是高場強(qiáng),所以要求體系中的離子濃度盡可能低,避免“短路”和電擊穿,這也是制備電擊感受態(tài)時(shí)要求反復(fù)用去離子水重懸浸洗菌體的原因所在。所以為了提高場強(qiáng)也為了增加工作面積,同樣的,電擊之前也要注意擦干電轉(zhuǎn)杯外表面的水份,防止高壓擊穿損壞。